Очистись Резус-фактор — это особый белок на поверхности эритроцитов. Его наличие или отсутствие имеет критическое значение при беременности и при переливании крови. Поэтому определение резус-фактора крови в этих случаях является обязательным и определяющим для здоровья и жизни пациентов.
Содержание
Определение резус-фактора крови рекомендуется при:
- Беременности;
- Плановой госпитализации перед операциями;
- Донорстве крови и подготовке к нему;
- Онкологических заболеваниях при проведении химиотерапии;
- Нарушениях свертываемости крови.
Последствия отсутствия определения резус-фактора
При игнорировании определения резус-фактора могут возникнуть серьезные осложнения:
- Гемолитическая болезнь новорожденных
- Тяжелые трансфузионные реакции при переливании крови
- Повреждение органов плода при резус-конфликте
- Острая почечная недостаточность при несовместимости крови
- Посттрансфузионный шок
Определение резус-фактора крови по системе типирования Резус
Система типирования Резус является второй по значимости для практической трансфузиологии. При плановых трансфузиях компоненты крови для переливания подбираются так, чтобы резус-принадлежности реципиента и донора совпадали.
Поэтому типирование крови по системе Резус обязательно проводится для всех доноров при первой донации. Кроме этого, по системе Резус должно быть выполнено типирование образцов крови беременных женщин с целью раннего выявления резус-конфликта — реакции иммунной системы матери с отрицательным резус-фактором на эритроциты резус-положительного ребенка, приводящей к развитию гемолитической болезни новорожденного (сокращенно ГБН).
Типирование по системе Резус желательно также проводить и при планировании беременности для определения вероятности возникновения резус-конфликта, если кровь отца и матери имеет разную резус-принадлежность.
Определение резус-фактора цоликлонами
Чтобы провести определение резус-фактора цоликлонами https://sangvitest.ru/opredelenie-rezus-faktora-coliklonami/, сначала выполняется исследование на наличие сильной формы антигена D на эритроцитах исследуемого образца крови. Для этого капля моноклонального реагента цоликлон Анти-D Супер (содержащего полные антитела класса IgM, флакон с черной этикеткой и черной крышкой) смешивается в пробирке или на плоскости с каплей исследуемой крови.
Если происходит гемагглютенация — образование и выпадение в осадок глобул или хлопьев — то кровь имеет положительный резус-фактор (Rh+). Агглютинация должна произойти быстро, а образовавшиеся сгустки или хлопья должны быть легко различимы невооруженным глазом.
Исследование на выявление слабых форм антигена D
Если быстрой явной и четкой реакции с реагентом Анти-D Супер не произошло, то проводится исследование на выявление слабых форм антигена D.
Для исследования необходимы неполные антитела класса IgG (раствор цоликлона Анти-D во флаконе с желтой этикеткой и белой крышкой) и усилитель агглютинации — раствор желатина, полиглюкина или альбумина.
Эритроциты исследуемой крови отделяются от сыворотки (например, центрифугированием или отстаиванием с последующим отбором пипеткой). Затем они инкубируются с раствором эритроцитарного диагностикума в присутствии высокомолекулярного соединения. Температура инкубации составляет +47 градусов Цельсия. Время инкубации — более десяти минут.
Если происходит выпадение осадка, то кровь типируется как (Rh+). В случае, если образования хлопьев или глобул не произошло, то кровь является резус-отрицательной (Rh-).
Исследование проводится с отрицательным контролем. Параллельно исследуемые эритроциты инкубируются только с усилителем агглютинации (без добавления раствора цоликлона Анти-D). В этом случае осадок образовываться не должен.
Разрешение спорных случаев
Для разрешения спорных случаев (плохо выраженная агглютинация с образованием мелких капель или зерен) проводится непрямая проба Кумбса (непрямой антиглобулиновый тест). Из образца исследуемой крови отделяются и отмываются эритроциты. Затем подвергаются инкубации с реактивом цоликлон Анти-D в течение 30 минут при температуре +37 градусов Цельсия. Инкубированные эритроциты отделяются от раствора антител центрифугированием, промываются, а затем подвергаются обработке антиглобулиновой сывороткой. В случае возникновения агглютинации кровь типируется как резус-положительная, при отсутствии реакции — как резус-отрицательная. Для таких образцов крови дополнительно проводится определение антигенов dCe и dcE цоликлонами Анти-C, Анти-E и Анти-CE.